技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 植物RNA的提取
植物RNA的提取
更新時間:2011-04-27   點擊次數:2811次

www.chem17.com/st175729/product_4737054.html有許多植物就是由于未能有效地分離純化其組織中的RNA, 而阻礙了其分子生物學方面研究的進展。這些植物組織中,或富含酚類化合物,或富含多糖,或含有某些尚無法確定的次級代謝產物,或RNase的活性較高。在完整的細胞內這些物質在空間上與核酸是分離的,但當組織被研磨,細胞破碎后,這些物質就會與RNA相互作用。酚類化合物被氧化后會與RNA不可逆地結合,導致RNA活性喪失及在用苯酚、氯仿抽提時RNA的丟失,或形成不溶性復合物;而多糖會形成難溶的膠狀物,與RNA共沉淀下來;萜類化合物和RNase會分別造成RNA的化學降解和酶解。對于這些植物材料,用常規的RNA提取方法(如胍法、苯酚法和十六烷基*基溴化胺法等)難以提取出其RNA!

縱觀上RNA提取的試劑盒,如常見的TRIzol,以及一些的RNA提取試劑盒均很難從多糖多酚的植物中提取高質量的RNA,酚類物質的含量會隨著植物的生長而增加。因而從幼嫩的植物材料中更容易提取RNA。此外,針葉類植物的針葉中多酚的含量比在落葉植物的葉子中要高得多。在植物材料勻漿時,酚類物質會釋放出來,氧化后使勻漿液變為褐色,并隨氧化程度的增加而加深,這一現象被稱為褐化效應。被氧化的酚類化合物(如醌類)能與RNA穩定地結合,從而影響RNA的分離純化;多糖的污染是提取植物RNA時常遇到的另一個棘手的問題。植物組織中往往富含多糖,而多糖的許多理化性質與RNA很相似,因此很難將它們分開。在去除多糖的同時RNA也被裹攜走了,造成RNA產量的減少;而在沉淀RNA時,也產生多糖的凝膠狀沉淀,這種含有多糖的RNA沉淀難溶于水,或溶解后產生粘稠狀的溶液。由于多糖可以抑制許多酶的活性,因此污染了多糖的RNA樣品無法用于進一步的分子生物學研究。

Trizol主要成份是異硫氰酸胍和苯酚,沒有特殊去除多糖和多酚的試劑,所以對于大多數多糖多酚的植物無法成功提取,即使添加了如2-巰基乙醇、二硫蘇糖醇(DTT)或半胱氨酸之類的防止酚氧化的試劑也很難提取。RNeasy Plant Mini Kit主要裂解液是鹽酸胍或則異硫氰酸胍。

 

 

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
主站蜘蛛池模板: 亚洲国产欧美一区| 国产国语一级毛片全部| 中文字幕中文字幕中中文| 欧美精品blacked中文字幕| 国产aaa女人十八毛片| 自拍偷拍校园春色| 婷婷被公交车猛烈进出视频| 久久精品视频观看| 欧美裸体xxxx极品少妇| 啊灬啊别停灬用力啊动视频| 好吊色永久免费视频大全| 在线观看欧洲成人免费视频| 中文字幕视频一区| 果冻传媒第一第二第三集| 亚洲色成人www永久网站| 英国video性精品高清最新| 国产精品一区二区在线观看| heyzo在线| 无码熟妇αⅴ人妻又粗又大| 亚洲av无码一区二区三区dv| 狠狠色噜噜狠狠狠狠97不卡| 国产一区在线观看免费| 麻豆国产一区二区在线观看| 国内精品国产成人国产三级| 一级成人a毛片免费播放| 日韩av午夜在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久| 玩弄放荡人妻少妇系列视频| 国产swag剧情在线观看| 黄色成人在线网站| 国产精品色拉拉免费看| ts人妖在线观看| 扒开双腿猛进入免费观看美女 | 亚洲av永久无码精品| 波多洁野衣一二区三区| 动漫美女吸乳羞羞动漫| 蜜臀av性久久久久蜜臀aⅴ麻豆| 国产电影入口麻豆| 800av我要打飞机| 天天干在线播放| 三级理论中文字幕在线播放 |