技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 假結核耶爾森菌PCR檢測試劑盒反應幾點要素
假結核耶爾森菌PCR檢測試劑盒反應幾點要素
更新時間:2020-08-12   點擊次數:1250次

假結核耶爾森菌PCR檢測試劑盒反應要素

假結核耶爾森菌PCR檢測試劑盒費用參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

 

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
主站蜘蛛池模板: 正能量www正能量免费网站 | 1024国产视频| 日产一区日产片| 亚洲日韩一页精品发布| 色丁香在线观看| 在线免费观看毛片网站| 久久精品国产精品亚洲毛片| 毛片女人毛片一级毛片毛片| 啊用力嗯快国产在线观看| 国产东北老头老太露脸| 大学生一级特黄的免费大片视频| 久久久久波多野结衣高潮| 欧美最猛黑人猛交69| 农村老熟妇乱子伦视频| 青青草国产成人久久91网| 国产精品亚洲综合一区在线观看| www.亚洲日本| 欧美一级欧美一级高清| 亚洲综合激情九月婷婷 | 婷婷五月深深久久精品| 亚洲国产成人精品无码区在线网站| 男朋友想吻我腿中间部位| 国产在线短视频| 80s国产成年女人毛片| 无码a级毛片日韩精品| 久久综合精品国产二区无码| 正在播放国产精品放孕妇| 全免费毛片在线播放| 亚洲五月六月丁香激情| 天天欲色成人综合网站| 久久久久久久99精品免费观看| 欧美专区在线播放| 伦理片中文字幕2019在线| 美女免费视频一区二区| 国产女主播喷水视频在线观看| 114级毛片免费观看| 夜色私人影院永久入口| 中文字幕在线观看第一页| 久久99久久99精品免观看| 欧美最猛性xxxxx69交| 人妻aⅴ无码一区二区三区|