技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒反應五要素
解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒反應五要素
更新時間:2021-05-19   點擊次數:1326次

解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

 

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
主站蜘蛛池模板: 国产亚洲人成无码网在线观看| 好男人社区www在线观看高清| 亚洲毛片在线免费观看| 被弄出白浆喷水了视频| 在线成人播放毛片| 免费一级毛片在级播放| 97无码免费人妻超级碰碰夜夜| 日本丰满岳乱妇在线观看| 免费无码又爽又刺激高潮视频| 另类视频第一页| 天堂…在线最新版资源| 久久se精品一区精品二区 | 网址你懂的在线观看| 国产浮力第一影院| 999精品视频在线观看热6| 成人免费一区二区三区| 久久婷婷丁香五月综合五| 欧美性大战久久久久久| 人文艺术欣赏ppt404| 美女黄色毛片免费看| 国内精品免费视频自在线| 久久婷婷香蕉热狠狠综合| 粗大猛烈进出高潮视频大全 | 久久人人爽人人爽人人片dvd| 欧美成人免费网站| 人妻影音先锋啪啪av资源| 羞差的漫画sss| 国产又黄又硬又粗| 男女一进一出抽搐免费视频| 天堂资源在线种子资源| 中文字幕无线码免费人妻| 日韩欧美中文在线| 免费日本黄色网址| 调教羞耻超短裙任务| 大学生美女特级毛片| 中文字幕在线观看一区二区| 杨幂一级做a爰片性色毛片| 又粗又大又黄又硬又爽毛片| 黄色香蕉视频网站| 天堂网www中文在线| 久久99视频精品|