做ELISA實驗收集血漿樣本時為什么要加抗凝劑？顧名思義，抗凝劑就是為了防止血液凝固的。加了抗凝劑后，血液在一定的時間內(nèi)會保持原來的物理化學狀態(tài)。如果沒加抗凝劑，血漿是凝聚在一起的，不好測定。常見的抗凝劑有哪些，各自又有什么優(yōu)點？

 1.乙二胺四乙酸（Ethylene Diamine Tetraacetic Acid，EDTA）鹽

    常用有鈉鹽或鉀鹽，能與血液中鈣離子結(jié)合成螯合物，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。
Na2C10H14O8N2+Ca2+→ CaC10H12O8N2+2Na++2H+
特點：對血細胞形態(tài)、血小板計數(shù)影響很小（但影響血小板聚集）。不適于凝血檢查、血小板功能試驗。

2.草酸鹽

    常用有草酸鈉、草酸鉀、草酸銨，溶解后解離的草酸根離子能與樣本中鈣離子形成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。2mg草酸鹽可抗凝lml血液。但不適于凝血檢查。而且，草酸鹽濃度過高還會導致溶血、改變血液pH，干擾血漿鉀、鈉、氯和某些酶活性的測定。
 

    雙草酸鹽抗凝劑：適用于血細胞比容、CBC、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)等檢查，不適于血小板計數(shù)、白細胞分類計數(shù)。

3.肝素

    是加強抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）滅活絲氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，從而阻止血液凝固。肝素是紅細胞透滲脆性試驗的理想抗凝劑。但不適于CBC、細胞形態(tài)學檢查。每毫升血液肝素用量為（15±2.5）U，多為肝素鈉鹽或鉀鹽。

4.枸櫞酸鹽

    常用的有枸櫞酸鈉，能與血液中鈣離子結(jié)合形成螯合物，阻止血液凝固。枸櫞酸鹽抗凝劑的抗凝力不如上述抗凝劑。枸櫞酸鈉與血液的抗凝比例為l：9或1：4.適用于紅細胞沉降率、凝血檢查，是輸血保養(yǎng)液的成分。